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Jun 28, 2023

Optimización de la homogeneización de muestras

Los investigadores de numerosos campos necesitan extraer moléculas de interés de muestras para su posterior análisis. Un paso temprano y crítico en el procedimiento de aislamiento es la homogeneización del tejido o la alteración celular,

Los investigadores de numerosos campos necesitan extraer moléculas de interés de muestras para su posterior análisis. Un paso temprano y crítico en el procedimiento de aislamiento es la homogeneización del tejido o la alteración celular, el proceso en el que las células se lisan para liberar analitos intracelulares, como ácidos nucleicos, proteínas o metabolitos. Estas moléculas se pueden analizar mediante diversas técnicas, incluidas PCR, NGS y Western blot. Dado que todos estos métodos de análisis dependen de una preparación de muestras eficiente y reproducible, la optimización de este paso es una prioridad.

La técnica de homogeneización más tradicional implica la pulverización mecánica de muestras de tejido utilizando un mortero. Sin embargo, este procedimiento requiere mucho tiempo, es laborioso y puede no ser óptimo dependiendo de las propiedades fisicoquímicas de la muestra.1 Los métodos no mecánicos, incluidas la lisis química y la sonicación, también pueden homogeneizar muestras. Sin embargo, el calor generado mediante la sonicación y los detergentes utilizados en la lisis química pueden ser perjudiciales para las moléculas frágiles, como el ARN.1,2

Los métodos mecánicos desarrollados más recientemente reducen la mano de obra y el tiempo necesarios para la lisis, además de aumentar la eficiencia de la homogeneización. Por ejemplo, la tecnología de batido de perlas en 3D utiliza un movimiento de perlas rápidamente acelerado para moler muestras de tejido.1 Las perlas dentro de los tubos de lisis se agitan mediante un movimiento oscilante multidireccional. Además, se encuentra disponible una gran variedad de kits de lisado que ofrecen oportunidades para homogeneizar cualquier tipo de muestra biológica. Estos kits incluyen tubos con un volumen de 0,3 a 15 ml, así como perlas compuestas de cerámica, vidrio o acero inoxidable, que varían en diámetro.

Además de los desafíos asociados con el método de lisis elegido, las propiedades de una muestra también pueden dificultar la extracción del analito. Algunas muestras sólo producen una pequeña cantidad de analitos, como el ADN de los espermatozoides. En consecuencia, los investigadores necesitan procesar volúmenes de muestra más grandes, que requieren más tiempo para homogeneizarse y pueden exceder los límites de volumen máximo del instrumento. Además, algunas muestras, como semillas, piel, huesos o tejido derivado de tumores, son difíciles de homogeneizar debido a su dureza, elasticidad, mineralización o naturaleza fibrosa.1,3–5 Para agravar aún más el problema, las muestras que son difíciles para lisar generan más calor, lo que lleva a la degradación o desnaturalización de algunos analitos termosensibles.

Precellys® Evolution Touch es un homogeneizador versátil de Bertin Technologies. Utiliza tecnología de batido de perlas, que es el estándar de oro para la homogeneización de tejidos, para triturar incluso las muestras más difíciles, como dientes y cabello, en unos pocos minutos. Es capaz de procesar muestras de diferentes tamaños, pesos y volúmenes. Además, puede homogeneizar hasta veinticuatro muestras simultáneamente. Como la simetría del instrumento permite que todos los tubos sigan el mismo movimiento, garantiza la misma eficiencia de homogeneización para cada muestra. Precellys® Evolution Touch está equipado con una pantalla táctil que responde incluso cuando el usuario usa guantes. Además, los investigadores pueden elegir entre treinta kits de lisis diferentes diseñados para homogeneizar muestras de diversas propiedades y volúmenes. Gracias a velocidades de hasta 10.000 rpm, se genera un calor mínimo a través de las muestras, garantizando así la seguridad de los analitos termosensibles. Además, el instrumento es compatible con la unidad de enfriamiento Cryolys Evolution, que le permite mantener la temperatura de la muestra entre 0 y 10 °C antes y durante la homogeneización.

Basado en la variedad de tamaños de tubos aceptados, las numerosas opciones de kits de lisis y la capacidad de procesar múltiples muestras simultáneamente, Precellys® Evolution Touch es un homogeneizador versátil y eficiente adecuado para muchos campos de investigación.

Referencias